全能核酸酶
产品概述
全能核酸酶是一种来自于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),经基因工程改造的核酸内切酶。能够在非常广泛的条件下(6MUrea,0.1M Guanidine HCl,0.4% TritonX-100,0.1% SDS,1mM EDTA,1mM PMSF)降解双链、单链、线状、环状的 DNA 和 RNA,完全将核酸降解成3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。
本品经基因工程改造在 Escherichia coli(E.coli)中发酵表达纯化并制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在基因治疗、病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂。
运输与保存方法:≤0°C 运输;-25~-15°C 保存,两年效期(避免冻融)。
单位定义:在 37°C,pH 8.0 条件下,在 30mi n 内使 z△A260 的吸收值变化 1.0(相当于完全消化37μg剪切鲑鱼精 DNA 成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
质量控制
• 宿主蛋白残留:酶联免疫检测试剂盒。
• 蛋白酶残留:250KU/mL 的全能核酸酶与底物反应 60min,未检测到活力。
• 细菌内毒素(Endotoxin):LAL-Test,中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法通则(1143)。
• 微生物负载:中国药典2020版第四部无菌检查法通则(1101),中华人民共和国国家标准,GB 4789.2-2016。
• 重金属残留:电感耦合等离子体发射光谱法,HJ776-2015。
使用条件
• SDS 浓度超过 0.1%,EDTA 浓度超过 1mM 时均会明显抑制核酸酶活力。
• 表活 Triton X-100,Tween 20 和 Tween 80 浓度不超过 1.5% 对核酸酶性质无影响。
用途及建议用量
• 用于去除疫苗类产品外源性核酸,降低核酸残留毒性风险,提高产品安全性。
• 用于降低核酸引起的料液粘度,缩短处理时间,提高蛋白产量。
• 用于去除缠绕在颗粒(病毒、包涵体等)表面的核酸,利于颗粒的释放和纯化。
• 用于柱层析、电泳和印迹分析的样品制备,核酸酶处理后可提高分辨率和回收率。
• 在基因治疗中除去核酸,得到纯化的腺相关病毒。